常用干热灭菌方法有哪些?

常用干热灭菌法包括火焰灭菌法、热空气灭菌法两种:
(1)火焰灭菌法:是一种利用火焰直接焚毁微生物最简单的干热灭菌方法。其特点是灭菌迅速、彻底,但它的使用范围有限,仅适用于能耐焚毁物件的灭菌,例如灼烧接种针和接种钩等金属用具,或通过酒精灯火焰数次对试管口、三角瓶口及菌种瓶口等进行灭菌。也可用火焰焚毁严重污染杂菌的培养基和菇体、培养物等。
在食用菌制种中,最常用的灼烧用具是酒精灯。酒精灯的火焰分为焰心、内焰和外焰三个部分。外焰燃烧充分,温度最高;内焰温度较低:焰心温度最低。所以进行灼烧物品灭菌时应置灭菌物于酒精灯火焰的外焰,酒精灯燃烧用的酒精浓度以95%为宜,浓度低燃烧不好,热度不够,灼烧灭菌效果差。
(2)热空气灭菌法:是利用加热的高温空气进行灭菌的方法,又称干热灭菌法、干烤灭菌法。干烤时热力的传播和穿透主要靠空气对流或介质传导。对室内空间,可用火炉或火堆,使室温升至60℃以上,并保持12小时,可达到灭菌目的。此法可同时排除潮湿空气,降低温度,抑制杂菌孳生。少量物品干烤灭菌,一般都在电热鼓风干燥箱内进行,将物品放在电热鼓风干燥箱中,通过加热使箱内空气温度上升而达到灭菌目的。
具体操作方法:①将事先洗涤晾干或烘干的培养皿、移液管等器皿用纸包好,放入干燥箱内,注意不要塞得太满,要留有空隙,使箱内空气流通和温度均匀;②关门后接通电源,转动温度调节旋钮,使温度逐渐上升至160℃~170℃,恒温保持2小时,然后切断电源;③待温度降至70℃以下时,方可打开箱门,切勿在高温时开门,以免因氧气突然进入箱内而引起明火,或因突然降温导致玻璃器皿破裂。本法只适用于制种中玻璃器皿及金属器械等灭菌,对培养基或其它含水分物质则不能使用。如果灭菌物品用纸包裹或带有棉塞时,必须严格控制温度不超过l70℃,以免烤焦报纸和棉塞而引起火灾。此法优点是灭菌彻底,可保持器皿干燥。

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