实验室检测食用菌液体菌种的方法有哪些

1、取样:

取样应该在接种前的24小时进行,韩国生产的发酵罐一般没有检测口,只能从接种口取样,国内生产的发酵罐都有取样口,取样环节会给发酵罐带来染菌的机会,这也是一些工厂不愿意进行取样检测的原因,所以取样必须操作熟练,按照严格无菌操作程序进行,取样容器一般为灭过菌的500ml三角瓶。

2、样品接种培养:

液体菌种样品培养可以用试管和平皿,建议使用平皿检测,观察更容易。在无菌状态下,将样品均匀倒在提前制备好的平皿培养基上,封口,在30℃的恒温培养箱中培养,一个样品做三个重复。

3、样品第一次镜检:

用剩余的样品进行显微镜检测,显微镜检测分两种,直接检测和革兰氏染色,建议两者都要进行。直接检测,在镜下很容易观察到可以游动的杆菌等,而革兰氏染色的好处是经过染色处理,能够分辨出细胞壁、细胞核等需要染色才能看清的结构。

除了在显微镜下观察是否有细菌存在,还有一点,就是要观察菌丝的大小、形态是否符合该品种菌丝的特征,霉菌在液体状态也会形成菌丝,比如青霉,青霉的菌丝比食用菌的菌丝要粗得多,还会形成孢子梗。而正常的菌丝,隔膜明显,镜下会发现大量的锁装联合存在。镜检为一次否决,即在镜下发现一处细菌,即可判定样品染菌。

4、确认平皿中培养的样品

24小时候观察平皿培养基上的样品,如果出现非食用菌的菌落,证明样品不存,带有细菌,则可以判定发酵罐染菌。如果平皿表面只有食用菌菌丝萌发,且没有光滑、奶酪状的液体出现,则判断发酵罐正常。

5、对平皿培养基上的样品进行第二次镜检,同样一次否决。

如果两次镜检和平皿培养都没有问题,则可做出结论,该发酵罐没有染菌,可以投入生产接种。

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